O le nucleic acid synthesis o loʻo faʻatinoina i le faʻaogaina o le sialic amide triglyceride metotia, lea e le mafai ai ona faʻaogaina le 3' pito o le DNA i luga o se vaega malosi ma faʻaopoopo nucleotides i le 3' i le 5' itu seia oʻo ina faʻapipiʻiina le vaega DNA manaʻomia. .E ese mai le DNA synthesis e ala i le faʻaogaina ole DNA polymerase.
O le 3' pito o le faavae muamua e le mafai ona faʻaogaina i luga o le CPG i le taimi o le faʻapipiʻiina, o le 5'-OH o le isi faʻavae e puipuia i le di-p-tolyl trityl DMT, o le vaega amino i luga o le faavae e puipuia i le benzoic acid ma le 3' -OH ona fa'agaoioia lea i se fa'atasiga amino phosphate.1 faʻavae o le 5 5'-OH o le 1 faʻavae ma le 3'-OH o le isi faʻavae e fausia ai se phosphite triglyceride, ona faʻamaʻiina lea i le iodine i se phosphate triglyceride, o le puipuiga i luga o le faʻavae lona lua 5'-OH ua aveesea e faʻaopoopo le dichloroacetic acid DM cycles e ala i le faʻaopoopoga o le isi faʻavae, ma a maeʻa le faʻapipiʻiina o le puipuiga i luga o le 5′-OH ua aveese ma se vaivai vaivai O le vaega ua motusia mai le resini malo ma le ammonium hydroxide concentrated, ua aveese le puipuiga mai le faavae. fa'atasi ai ma le ammonium hydroxide fa'atumauina i lalo o le fa'avevela, e aveese le ammonium hydroxide, fa'amamago le vaega, ma fa'amamāina le nucleic acid e le chromatography vai po'o le ITULAU.
Laasaga ole Oligo Synthesis
Deblocking
O le5 fa'ai'uga DMT puipuiga vaega ua aveesea e ala i le faaopoopo TCA fofo.
Fa'ato'aga
Faafefiloi le activator ma le oligonucleotide monomer e fausia ai le oligonucleotide monomer malosi intermediate.
Feso'ota'iga
O le vaega 5-terminal hydroxyl e tali atu ma le oligonucleotide malosi intermediate i se anti-generative condensation tali e fausia ai se sootaga phosphite triglyceride le mautu.
Tapuni
O le fa'aopoopoina o se sui fa'apipi'i e fa'atino ai se tali fa'apipi'i acetylation fa'atasi ai ma kulupu hydroxyl sili atu e le o a'afia i le fa'afefete.
Fa'ali'iina
O le fa'aopoopoina o le vaifofo iodine o lo'o i ai le vai e tali atu i fusi phosphite le mautu e ala i le fa'ama'iina e fausia ai fa'amauga fa'amautū o le phosphoric acid triglyceride.
Cyanoethyl Cleavage
O le nucleic acid oloa ina ua maeʻa faʻatasi, faʻatasi ai ma le faʻaopoopoga o le DEA solution e aveese ai le cyanoethyl group mai le phosphate triglyceride bond.
Fa'amama ma le Puipuia
O vaega o le nucleic acid e ta'e ese mai le vaega mautu e ala i le fa'aopoopoina o se vaifofo ammonium hydroxide fa'ato'atoa ona fa'avevela lea e aveese ai vaega puipuia mai fusi hydrogen o fa'avae.
Taimi meli: Nov-21-2022