Le mataupu faavae o le DNA synthesis

Ole fa'asologa ole DNA ole vaila'au e fa'avae i luga ole ta'iala ole fa'asologa ole fa'asologa ma le kemisi phosphoramidite.E ese mai i le biological DNA synthesis, o le meafaitino i le chemical DNA synthesis o le DMT (4, 4-dimethoxytrityl) ma le phosphoramidite modified deoxyriboxyside, e pei ona faʻaalia i le Ata 1. O le DNA synthesis o loʻo faia i luga o le lagolago malosi (e mafai ona matou ofoina atu ni mea eseese.Oligo Synthesis Column), e pei o le CPG (fa'ata'ita'i pupuni pulea) ma le PS (polystyrene), ma o le fa'asologa atoa e faia i luga o seDNA/RNA synthesizer, o a tatou meafaigaluega autu, ei ai faʻataʻitaʻiga eseese e pei o: HY Single Channel Synthesizer, HY-12, HY-192 ma isi mea, o le faʻasologa faʻasologa e mai le 3 'i le 5', ma o le nucleotide e faʻafeiloaʻi i le lagolago malosi e ala i le tasi fa'asologa fa'atasi.O le fa'asologa fa'asologa masani e aofia ai laasaga e fa, Deprotection, Coupling, Capping and Oxidation (Ata 2).O le Deprotection ua setiina e aveese le vaega DMT i luga o le lagolago malosi poʻo le 5' hydroxyl group i luga o le nucleoside muamua, o le 3% trichloroacetic acid i le dichloromethane o loʻo faʻaaogaina e avea ma mea faʻafefete.Ona faatagaina lea o le phosphoramidite suia deoxyriboxyside e faʻaalia vaega hydroxyl faatasi ai ma le fesoasoani a le activator, ie 5-ethylthiotetrazole po o 4, 5-dicyanoimidazole, fausia le phosphitetriester (III), ma iloa le laasaga Coupling.E faia se la'asaga Capping e poloka ai le vaega o le hydroxyl e le'i tali atu i le la'asaga fa'apipi'i, e fa'aitiitia ai le fa'atupuina o fa'asologa o faaletonu e le mana'omia.Ma le mea mulimuli, o le phosphitetriester le mautu (III) ua faʻamaʻiina i le vailaʻau faʻamaʻi phosphotriester (V) faʻatasi ai ma iodine e pei o le oxidant i le taimi nei o le pyridine.

O le DNA faʻapipiʻiina e mafai ona vavae ese mai le lagolago malosi e ala i le aminolysis, o le 2-cyanoethyl puipuia vaega i luga o le phosphotriester ma le amide i luga o le nucleobase o loʻo vaeluaina i le taimi lava e tasi, o le Synthesis Plates ma Synthesis Columns i fata e tuʻu saʻo i le potu tali. o leMea Fa'asa'o.E mafai ona saunia DNA Crude e HPLC, electrophoresis ma OPC pe a manaʻomia, e mafai foi ona matou tuʻuina atu ia te oe leMea Fa'amamāinamo le Post-processing.

Le mataupu faavae ole DNA synthesis1

Ata 1. Le fausaga kemikolo o le dABzphosphoramidite.

Le mataupu faavae o le DNA synthesis2

Ata 2. Le fa'aogaina ole fa'asologa ole DNA.


Taimi meli: Aukuso-09-2022